国际会议

WCLC 2015|王洁:非小细胞肺癌治疗中小细胞肺癌转分化的临床证据及分子机制初探

Published at: 2015年第1卷第64期

王洁 , 仲佳
关键词:

编者按:第 16 届世界肺癌大会(WCLC)于 9 月 6-9 日在美国丹佛进行得如火如荼。当地时间 9 月 8 日 16:45 - 18:15(Mini Oral 16: EGFR Mutant Lung Cancer 2 ),北京大学肿瘤医院的王洁教授代表其团队汇报了“Lung Adenocarcinoma Transformation into Small-Cell Lung Cancer after Treatment: Clinical Evidence and the Exploratory Mechanism”的研究结果,下面请看详细报道。

 

背景及目的:EGFR-TKIs 治疗中,EGFR 突变型肺腺癌向小细胞肺癌的转化是近年来发现的 EGFR-TKI 耐药机制之一。然而目前临床报道病例数少,机制不明。以往研究曾经发现同时敲除 TP53 和 RB1 的转基因小鼠可以驱动出小细胞肺癌的表型,推测 TP53 和 RB1 可能与肺癌表型转化相关。本研究在对发生病理表型转化的临床病例原发灶、转移灶进行全基因组测序基础上,进一步在细胞系中进行 TP53 和 RB1 的敲减,并进行功能验证,为探索肺癌治疗中小细胞肺癌表型转化的分子机制提供新的思路和方向。

材料及方法:① 选取 2011 年 3 月至 2015 年 1 月就诊于我科原发灶切除并病理证实为 NSCLC,转移灶病理证实为 SCLC 的患者 3 例。对这三例患者原发灶进行深切,HE 染色及免疫组化辅助诊断。对原发灶及转移灶进行全基因组测序分析。② 选取肺腺癌细胞系 PC-9,HCC-827,H1975 作为研究对象。这三株肺腺癌细胞系本身具有 P53 基因突变,慢病毒感染敲减 RB1 基因。Western blot 及细胞免疫化学检测敲减前后小细胞肺癌神经内分泌标志的表达。Transwell 细胞侵袭实验和软琼脂糖克隆形成实验证实细胞侵袭和迁移能力的改变。DHPLC(Denaturing high performance liquid chromatography)方法检测敲减前后 EGFR 突变。用吉非替尼和依托泊苷处理敲减后细胞的增殖曲线采用 CCK8 试剂盒进行细胞增殖测定。流式细胞术用以检测细胞周期和细胞凋亡。最后将细胞接种于 balb/c 小鼠双腋下成瘤进行验证。统计分析用 SPSS1 6.0。

结果:① 对 3 例具有表型转化的原发灶切除标本进行深切及免疫组化染色,均未见小细胞肺癌成分。其中两例为腺癌向小细胞肺癌转化,一例为鳞癌向小细胞肺癌转化。测序发现转化后组织均存在 RB1 缺失。转化前后组织具有不同的拷贝数变异(Copy number variation, CNV)模式。② PC-9、HC827 和 H1975 细胞系敲除 RB1 基因后出现神经内分泌标志物的上调,Bcl-2 家族蛋白水平的上调,细胞侵袭和迁移能力增强,细胞周期更多分布于 G2+S 期,然而细胞表型及药物敏感性未发生变化。敲减前后细胞 RNA seq 结果分析与上皮细胞分化相关的一组基因(AQP3,NME2,OVOL2,MAFF)差异最具显著性。结论:TP53 和 RB1 基因功能缺失后的腺癌细胞系表现出神经内分泌标志的上调,侵袭和迁移能力增强,以及细胞周期和凋亡的变化。这些现象说明 TP53 和 RB1 缺失是小细胞转化的必要条件。然而药物敏感性和表型尚未发生变化,提示可能存在其他机制促进小细胞转化过程。

结论:TP53 和 RB1 基因缺失确实存在于临床发生小细胞肺癌表型转化的患者中。TP53 和 RB1 基因功能缺失后的腺癌细胞系表现出神经内分泌标志的上调,侵袭和迁移能力增强,以及细胞周期和凋亡的变化。这些现象说明 TP53 和 RB1 缺失是小细胞转化的必要条件。然而药物敏感性和表型尚未发生变化,提示可能存在其他机制促进小细胞转化及其介导的耐药过程。

作者|王洁,仲佳,北京大学肿瘤医院。

王洁,内科学博士、肿瘤学博士后。北京大学肿瘤医院胸部肿瘤内一科(原胸部肿瘤内科)主任医师、教授、博士生导师,科主任。中国抗癌协会肺癌专业委员会常委,CSCO执行委员,北京市医学会肿瘤专业委员会副主任委员,中国临床肿瘤学会小细胞肺癌专家委员会副主任委员,中国临床肿瘤学会肉瘤专家委员会副主任委员。Clin. Lung Cancer, 中华结核与呼吸杂志及中国肺癌杂志、Thoracic Cancer 编委,中国胸部肿瘤协作组(Chinese Thoracic Oncology Group, CTONG)委员。2008年入选国家“十、百、千”人才计划。2010年获得国家自然科学基金“杰出青年基金”资助。获2011年中国青年女科学家奖及北京市学科带头人基金。先后获得中国抗癌协会科技进步一等奖、北京市科技进步三等奖、中华医学会医学奖三等奖、教育部科技成果二等奖、华夏科技成果二等奖等。《中华结核与呼吸杂志》编委、《中国肺癌杂志》编委、Clinical Lung cancerThoracic Oncology 编委。

仲佳,北京大学肿瘤医院胸内一科博士研究生,导师:王洁教授。

 

WCLC 2015 专题

comments powered by Disqus

附件